Evaluación de la producción de taq polimerasa a partir de cepas clonadas de Escherichia coli (Theodore von Escherich) para la amplificación de ADN vegetal, en el Laboratorio de Biotecnología, UNAN-Managua. Febrero 2017 - Octubre 2018

López Altamirano, Felix Octavio (2018) Evaluación de la producción de taq polimerasa a partir de cepas clonadas de Escherichia coli (Theodore von Escherich) para la amplificación de ADN vegetal, en el Laboratorio de Biotecnología, UNAN-Managua. Febrero 2017 - Octubre 2018. Other thesis, Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua.

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Abstract

La Taq polimerasa es una enzima termoestable a altas temperatura indispensable para la implementación de técnicas moleculares fundamentales para el desarrollo de investigaciones biotecnológicas debido a que amplifica fragmentos de ácido desoxirribonucleico (ADN) con una alta fidelidad. Teniendo en cuenta su gran importancia y sus altos costos, el presente estudio planteó como objetivo principal evaluar la producción de Taq polimerasa a partir de cepas clonadas de Escherichia coli (E. coli). La identidad de las cepas clonadas se verificó mediante su crecimiento selectivo en caldo LB Miller y agar LB Miller con ampicilina (80 mg/ml), la caracterización morfológica de las colonias, tinción de Gram y extracción de ADN plasmídico. El protocolo de producción utilizado como base para la producción de Taq polimerasa corresponde a una modificación del método desarrollado por Bognanni y Lazzarini (2015) cuya variación principal radica en la sustitución de los reactivos descritos por equivalentes disponibles en el Laboratorio. La verificación de la actividad enzimática se realizó mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR, por sus siglas en inglés) utilizando los primers MTcCIR18 y Y16991 utilizados dentro del conjunto de marcadores internacionalmente establecidos para la caracterización molecular de cacao (Theobroma cacao L.) mediante la metodología de secuencias simples repetitivas (SSR, por sus siglas en inglés) con un rango esperado de amplificación entre 333 y 357 pares de bases (pb).

Item Type: Thesis (Other)
Additional Information: Monografia-(Licenciado en Biología con Mención en Educación Ambiental)Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua EDUAM 378.242 lop 2018
Uncontrolled Keywords: Gestión Ambiental, ácido desoxirribonucleico ADN Plásmido, Bacteria, Escherichia coli
Subjects: 500 Ciencias naturales y matemáticas > 570 Biología > 572 Bioquímica
500 Ciencias naturales y matemáticas > 570 Biología > 579 Microorganismos, hongos, algas
Divisions: FACULTAD DE CIENCIAS E INGENIERÍA > Biología Mención en Educación Ambiental
Depositing User: MSc. David Montalvan
Date Deposited: 16 Nov 2020 20:21
Last Modified: 16 Nov 2020 20:21
URI: http://repositorio.unan.edu.ni/id/eprint/13725

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